生化試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑，前者特別適用于半自動(dòng)生化分析儀和小型自動(dòng)生化分析儀，使用方便，缺點(diǎn)是穩(wěn)定性較差。與單試劑相比，雙試劑提高了抗干擾能力，具有穩(wěn)定性能較好，可消除樣品自身空白等特點(diǎn)。此外還有多項(xiàng)同測(cè)組合試劑、濃縮試劑等。
 

　　生化試劑盒的操作流程如下：
 

　　(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
 

　　(2)酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
 

　　(3)洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后，即甩去)，之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
 

　　(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
 

　　(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
 

　　(6)洗板，同(4)。
 

　　(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
 

　　(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
 

　　(9)洗板，同(4)。
 

　　(10)每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
 

　　(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
 

　　(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2)，以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
 

　　(13)數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。